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時間:2024-11-01 來源:admin 點擊:192次
大腸菌群(大腸桿菌)檢測實驗培養(yǎng)基(LST)滅菌時,偶爾會有小氣泡留在小導(dǎo)管內(nèi),導(dǎo)致培養(yǎng)基不能使用。重復(fù)滅菌不僅費時費電,還會破壞培養(yǎng)基的成分。
原因一:過早打開滅菌鍋
當(dāng)滅菌鍋壓力表示數(shù)為0而溫度表示數(shù)還高于室溫時,不要打開滅菌鍋。因為打開鍋蓋瞬間,鍋內(nèi)大量熱量散出,溫度突然降低,試管內(nèi)溫度也隨著降低,導(dǎo)致管內(nèi)氣壓減小,沸點降低,部分水會汽化留在小導(dǎo)管內(nèi)。
原因二:試管塞塞得太緊(使用硅膠塞的時候)
試管塞塞得太緊在滅菌時會導(dǎo)致試管內(nèi)與滅菌鍋內(nèi)壓力不一致。在滅菌鍋升溫升壓時,鍋內(nèi)壓力會大于管內(nèi)壓力;滅菌鍋降溫降壓時,鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力。鍋內(nèi)壓力會大于管內(nèi)壓力時,試管內(nèi)壓力不夠,不能將小導(dǎo)管內(nèi)氣體排盡,就留有氣泡;鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力時,可能會使試管塞和培養(yǎng)基崩出,培養(yǎng)基報廢。
原因三:小導(dǎo)管口太小或者太長
我們可以把一根毛細(xì)管一端封口,另一端插進(jìn)水里,毛細(xì)管里怎么都不會進(jìn)水。同樣把一個燒杯倒扣進(jìn)水里就很容易進(jìn)水了。小導(dǎo)管在加壓后一方面水要進(jìn)去,另外里面的空氣要出來,如果口太小的話,空氣不容易出去,水也不容易進(jìn)來,就會導(dǎo)致氣泡留在里面了。
原因四:培養(yǎng)基質(zhì)量引起
由培養(yǎng)基質(zhì)量引起的氣體不能排盡或培養(yǎng)基含有高溫高壓分解產(chǎn)氣的成分。滅菌時用水做培養(yǎng)基組的對照試驗,若培養(yǎng)基組有氣泡,而對照組沒有氣泡,可確定是有此原因引起。
原因五:滅菌鍋工作壓力不夠,使氣體不能排盡
滅菌鍋最大壓力不夠不能使管內(nèi)液體強行把氣體擠出,最后還留有小氣泡,還會使溫度上升緩慢,或達(dá)不到滅菌溫度。此原因的可能性較小,我們可以在排除原因一、二、三、四的情況下,用不加試管塞、大口導(dǎo)管做試驗,若還仍不能達(dá)到效果,就要檢查滅菌鍋了。
一種高效的替代方法就是使用君立康即用型管裝培養(yǎng)基。
一、在實驗中液體渾濁的時候,傳統(tǒng)方法看不到產(chǎn)氣,君立康即用型管裝培養(yǎng)基自帶透視窗,可以直接查看到實驗中是否產(chǎn)生氣泡。
上圖中試管最左側(cè)是傳統(tǒng)方法陰性對照,最右側(cè)是君立康的試管的陰性對照,中間的前三根試管是加了樣品后傳統(tǒng)方法看不到產(chǎn)氣現(xiàn)象,后三根試管是加了樣品后君立康的試管可以清晰的看到產(chǎn)氣現(xiàn)象
二、試管中含有產(chǎn)氣收集裝置,即使在實驗前培養(yǎng)基中產(chǎn)生了氣泡,也可以將試管傾斜將氣泡導(dǎo)出。不會浪費培養(yǎng)基。
產(chǎn)氣收集裝置
傾斜排氣